板蓝根有效成分提取的影响因素

于鑫鑫 徐龙广 （大庆志飞生物化工有限公司 黑龙江大庆 163411）

板蓝根为十字花科植物菘蓝和草大青的干燥根，植株高50~100厘米。根肥厚，近圆锥形，直径2~3厘米，长20~30厘米，表面土黄色，其短横纹极少数须根。靛蓝、靛玉红为其中的有效成分之一。板蓝根是常用中兽药，在临床上具有清热解毒、凉血利咽和消肿的功能。其传统提取工艺均为水煮醇沉，其有效成分损失过大。为了减少有效成分的损失，拟采用醇提和超滤工艺，以总氮和靛玉红含量为指标，用筛选试验对加醇倍数进行考察。并对浓缩温度、干燥温度及浓缩体积进行了比较研究，以初步确定合理的工艺条件。现介绍如下，供大家参考。

1 仪器与试剂

岛津LC-10ATvp液相仪、spD-10Avp检测器、RPL-C2000柱温箱，RE-52AA旋转蒸发仪、可调式MH5000型电热套，靛玉红对照品（购自中国药品生物制品检定所）、精氨酸对照品（购自中国药品生物制品检定所），95%乙醇（购自北京市化学试剂厂），其他所用试剂均为分析纯。购于山西省中药材公司，产地为河北安国。

2 板蓝根的提取方法

色谱柱为Shim-PackCLC-ODS、Alltech预柱，柱温为30℃，流动相为甲醇-水（80∶20）（0.1%的二乙氨，用醋酸调中性），流速为1毫升/分，检测波长为290纳米。

对照品溶液制备标准曲线，称取经五氧化二磷干燥至恒重的靛玉红对照品10.58毫克，置250毫升容量瓶中，用100毫升氯仿溶解，并加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取25毫升，置50毫升容量瓶中，添加甲醇至刻度，摇匀。分别精密吸取1.0、2.0、4.0、8.0、10毫升置10毫升容量瓶中，加入氯仿-甲醇（20∶80）的溶液至刻度，摇匀，即得浓度为1.25、2.45、4.89、8.90、17.72克/毫升的对照品溶液。20升定量环满刻度进样，按上述色谱条件测定，以靛玉红对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

3 影响因素

加醇倍数。称取板蓝根药材200克，按上述最佳提取条件提取、回收乙醇、离心和超滤，得沉淀与滤渣，合并沉淀和滤渣，充分拌匀分为二等份，第一份分别用4倍和2倍乙醇提取2次，每次1小时。第二份分别用3倍和2倍乙醇提取两次，每次1小时。滤过，滤渣按浸膏供试液制备方法制备供试液，用高效液相色谱法测定，结果表明4倍和2倍乙醇提取，可把沉淀和滤渣混合物中的靛玉红提尽。乙醇体积为6倍时，靛玉红含量为0.2微克。当乙醇体积为5倍时，靛玉红含量为22.4微克。

浓缩温度。称取60克药材按最佳提取工艺提取，提取液平均分为3等份，分别在45℃、65℃、85℃条件下浓缩至浓浸膏后，按浸膏供试液制备方法制备供试液，用高效液相色谱法测定，可知浓缩温度对靛玉红含量无影响，综合考虑浓缩温度选择60℃为宜。当浓缩温度为45℃时，靛玉红含量为60.2微克。当浓缩温度为65℃时，靛玉红含量为63.5微克。当浓缩温度为80℃时，靛玉红含量为61.7微克。

干燥温度。称取300克药材，按上述工艺超滤提取。（www.nczfj.com）回收浓缩得浸膏，均分为3等份，分别在45℃、65℃、85℃烘干，烘干后按浸膏供试液制备方法制备供试液，用高效液相色谱法测定。干燥温度为45℃时，靛玉红含量为220.7微克。干燥温度为65℃时，靛玉红含量为189.1微克。干燥温度为85℃时，靛玉红含量为143.9微克。可知干燥温度对靛玉红含量有较大影响，故干燥温度选定为45℃。

浓缩体积。称取190克药材按上述最佳工艺提取，提取液过滤，滤液平均分为3等份，第1份体积不变，第2份加60%的乙醇至原体积2倍，第3份加60%的乙醇至原体积的4倍，分别在60℃条件下浓缩至浓浸膏后，按浸膏供试液制备方法制备供试液，用高效液相色谱法测定，可知浓缩体积对靛玉红含量有显著影响，故在工艺优选中，用95%的醇从滤渣与沉淀中提取靛玉红时，应用最少体积的乙醇。浓缩体积为1倍时，靛玉红含量为250.2微克。浓缩体积为2倍时，靛玉红含量为89.3微克。浓缩体积为4倍时，靛玉红含量为40.6微克。

4 结论

综上所述，加醇倍数、浓缩温度、干燥温度及浓缩体积都对板蓝根有效成分回收效率有影响，但是浓缩温度影响较小。通过对影响板蓝根提取工艺因素的分析，生产部门应根据自身实际情况来确定具体操作方法，以提高板蓝根提取的产量。