王 娇 (辽宁省黑山县大虎山动物卫生监督所 121400)
猪腺病毒感染极其普遍,猪场感染率很高,一般为无临床症状的隐性感染。由于病原性和病毒型及猪群的免疫状态差异,能引起动物脑炎、肺炎、肾炎、孕猪流产。总的来看,迄今人们对猪腺病毒的危害和构成的经济损失还不十分清楚,更没有将此病的诊断和防制提到本地临床兽医工作日程上来。
1 流行病学
猪腺病毒的自然宿主只局限于猪,各品种、性别、年龄的猪均可感染,其中仔猪易感性较高。成年猪血清抗体价很高,很少排毒。病猪和带毒猪是本病主要传染源。哺乳仔猪受母源抗体保护较少发病。断奶后仔猪失去乳汁抗体的免疫保护而感染,呈现发病或隐性感染,病猪以粪便排毒为主。感染途径以粪-口径路消化道感染为主,呼吸道感染也很敏感。病毒进入体内首先在扁桃体和小肠后段复制,继而扩散到脑、肺、心、肝、肾和脾等脏器,猪腺病毒4型F 618参考毒株就是从某头厌食且患肠炎病猪的脑组织中分离出来的。实验证明病毒可持续存在于猪肾和其他脏器组织中,并不断向体外排毒,污染环境、饲料、饮水,使易感动物经口或呼吸道感染。本病无季节性,但应激因素、混合感染等可加剧致病作用,如在有支原体肺炎和猪接触性传染性胸膜肺炎等疾病存在条件下猪腺病毒的损害加剧。
2 临床症状
口服或滴鼻人工感染仔猪,本病潜伏期为3~4天。仔猪精神欠佳,厌食,通常都有肠炎症状,弓腰顾腹,排软便、粥样便或稀水便,肛周和后肢飞节附有粪污,腹泻程度个体间差异很大,腹泻持续时间长短不一,有时呕吐,呼吸症状轻微。有的运动共济失调,肌肉颤抖,经常卧地不起,生长迟缓,极少死亡,多数可以耐过。即使人工接种2型或3型猪腺病毒也不出现临床症状。1型猪腺病毒接种经常可以引起临床发病,子宫内接种可引起母猪流产,4型猪腺病毒经鼻接种可引起间质性肺炎。
3 病原学诊断
采集和送检。细胞培养物种类。(www.nczfj.com)病毒通常可在胎猪和仔猪肾、胎猪肺、胎猪睾丸等原代细胞上生长繁殖,更能在PK-15细胞系中复制并产生特征性细胞病变(CPE),所以一般都使用PK-15分离猪腺病毒。
病毒分离。将已长成单层的细胞培养管弃去培养液,用Hank´s氏液洗2次。每份标本接种4个细胞管,每管加入已处理的待检样品悬液0.2毫升。37℃感作1小时,期间摇动3次。弃掉接种物,加入1%胎牛血清和100国际单位/毫升青霉素,100微克/毫升链霉素的MEM营养液,37℃静止培养。第二天用低倍镜观察一次是否出现CPE,连续培养14天。若无细胞病变,则将培养物反复冻融3次后连续盲传2代,仍无CPE视为病毒分离阴性。若有CPE则表现为细胞变大、变圆、变暗、颗粒增多、有核内包涵体、集聚成堆,形似葡萄串状。细胞传代适应毒接种PK-15后18~20小时即可出现严重CPE。
细胞培养病毒分离物的鉴定。虽通过有特征性的CPE变化和查出核内包涵体基本可认为该病毒是猪腺病毒,但尚需选用如下检验技术予以进一步鉴定。用电子显微镜负染色观察有特征性形态的猪腺病毒,用直接免疫荧光诊断法检出胞核荧光,或琼脂扩散试验有群特异性沉淀线,均可证明分离到猪腺病毒。在此基础上用已知型特异性抗血清与分离物进行病毒中和试验,以确定病毒型别。猪腺病毒有四个型,致病性差异较大,人工接种2、3型一般不引起发病,通常认为1型病原性较强,4型可引起间质性肺炎。所以在确定病毒型之后宜应用该型阴性猪或无特定病原体猪做动物接种试验,借此明确猪腺病毒分离物的致病性。
4 病理学诊断
有关猪腺病毒感染猪病变的描述主要是基于试验性人工感染猪病变所见,本地资料较少。
人工接种猪腺病毒的仔猪可以形成不同程度肺萎陷区,组织学观察见猪有肺泡间质细胞增生性的间质性肺炎,其中白细胞、浆细胞和组织细胞在间质内浸润,以肺泡隔膜显著增厚为特征。眼观肾有出血点或淤血斑,组织切片检查见肾小管营养不良、萎缩,毛细血管扩张。脑组织内常见神经胶质细胞灶状积聚和脑血管周围形成淋巴细胞为主的管套现象为特征的脑膜炎病变。肠系膜淋巴结肿大,切面外翻且多汁。大小肠有肠炎变化,内容物为黄色稀便,空肠后段和回肠绒毛发育不良。肺、肾、肠组织切片Giemsa染色看到核内包涵体表明是猪腺病毒感染。
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