猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的一种高度接触性肠道传染病,于1977年在比利时首次被发现,1982年被命名为猪流行性腹泻,我国于 1980年首次分离得到PEDV。近年来,山东、河南、湖北等省多个地区陆续发生,渐呈流行之势,仔猪死亡率最高,可达100%,给养猪业造成非常严重的经济损失。本文就近期流行性腹泻的流行情况开展调查,对病毒进行分离鉴定后对市场上不同类的疫苗免疫效果进行研究,确立了PED的综合防控技术,为养猪户提供参考,以推动养殖业的快速发展。
一、流行病学
猪流行性腹泻可单一发生或与猪传染性胃肠炎混合感染。猪流行性腹泻病毒为类冠状病毒,该病毒在65℃条件下10分钟左右就可杀死;在阳光下6~8小时可灭活;在阴暗环境中7~10天具有感染力;用0.5%苯酚在37℃下处理30分钟可杀死。康复猪可排毒2个月以上,甚至长达109天。
该病多发于冬季,山东省2010年冬季就曾发生,自2013年9月至2014年1月情况越发严重,表现为传播速度快,很快波及到所有猪群,已经严重影响养猪业的健康发展。
目前,市售疫苗种类繁多,有联合疫苗,有基因缺失苗,但疫苗质量良莠不齐,再加上抗生素的滥用,治疗方案五花八门,乱用疫苗的现象非常普遍,导致毒株变异、毒力增强,给养猪业带来重大损失。因此,研究一套合理有效的疫苗免疫方案,制定效果确实的疾病治疗方案具有重要意义。
二、临床症状与病理变化
人工感染的潜伏期,新生仔猪为15~30小时,育肥猪为2天,自然感染可能稍长些。该病的主要临床症状为水样腹泻,或者伴随呕吐。猪流行性腹泻病常以暴发性腹泻的形式发生在非免疫断奶仔猪(I型)或各种年龄的猪(Ⅱ型)。患猪表现出呕吐、腹泻和脱水,与猪传染性胃肠炎相似,但程度较轻、传播稍慢;粪稀如水,呈灰黄色或灰色;呕吐多发生于吃食或吮乳后。少数患猪体温升高1~2℃,精神沉郁,食欲减退或不食,尤其是繁殖种猪。症状的轻重随年龄的大小而有差异,年龄越小,症状越重,1周内新生仔猪常于腹泻后2~4天内脱水而死,病死率70%~100%。断奶猪、育肥猪以及母猪常呈现沉郁和厌食症状,持续腹泻4~7天,逐渐恢复正常。成年猪仅表现沉郁、厌食、呕吐等症状,如果没有继发感染且护理得当,猪很少发生死亡。
剖检可见主要病变为小肠膨胀,充满淡黄色液体,肠壁变薄,个别小肠黏膜有出血点,肠系膜淋巴结水肿,小肠绒毛变短,重症者绒毛萎缩,甚至消失。胃经常是空的,或充满胆汁样黄色液体。其他实质性器官无明显病变。
三、病毒分离鉴定
从2013年9月开始,沂水、莒县地区曾有2个养殖场(猪群总构成为母猪1227头,种公猪40头,育肥猪6833头,保育猪和仔猪3817头)发生过仔猪腹泻。随机采集临床有腹泻症状的哺乳仔猪采取小肠内容物,(www.nczfj.com)共10份,送到山东农业大学实验室检测,证实该病原为猪流行性腹泻病毒。
四、疫苗免疫试验
1. 试验材料
①试验猪
本试验于2013年10~12月在沂水锦程畜牧科技发展有限公司环保猪场进行。随机选取同期妊娠健康母猪20头,随机分为A、B、C、D、E共5组,每组5头,相互分栏隔离饲养管理。
②试验用疫苗
本试验所用的两种疫苗均从市场购买,分别为TB腹泻特制二联灭活苗、青岛易邦PEDV基因缺失苗。
③病毒来源
本试验攻毒所用的病毒液来自本场经过病毒分离鉴定的毒株——7日龄仔猪肠道及内容物,RT-PCR检测为PEDV阳性,加入青霉素、链霉素研磨,使其终浓度为1000IU/毫升,加入到30%甘油生理盐水中,-20℃保存备用。
2. 试验方法
①试验前准备
试验开始前给母猪标耳号、仔猪称重,观察猪只采食量、粪便和精神状况等,做好相关记录。采用RT-PCR方法对猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒基因进行检测,确定为阴性。
②疫苗接种。对4组共20头试验猪按说明后海穴注射疫苗,对照组5头不进行疫苗免疫。A组于产前70天注射TB腹泻特制二联灭活苗,产前40天加强1次;B组于产前60天接种PEDV基因缺失苗,产前40天加强免疫1次;C组于产前70天注射TB腹泻特制二联灭活苗,产前40天加强1次,产前60天接种PEDV基因缺失苗,产前40天加强1次;D组在产前40天,实行反饲试验,直接饲喂经抗生素处理的PEDV阳性仔猪肠道及内容物5毫升/天,连续饲喂3天;E组为空白组。
③攻毒
剂量为5毫升/头,方法为口服。攻毒后观察记录母猪、仔猪的采食量、精神状态、排便、发病和死亡等情况。
3. 结果
攻毒后,猪只的基本情况见表1。妊娠母猪出现不同程度的腹泻,粪便呈水样、恶臭,治疗后1~2天康复,无死亡。哺乳仔猪死亡率较高,仔猪最早出生后2小时出现腹泻症状,腹水和运动僵硬见于接毒后20~30小时,最晚见于90小时。腹泻开始时排黄色黏稠便,以后变成水样便,混杂有黄白色的凝乳块,腹泻最严重时粪便几乎全部为水。呕吐、腹泻的同时患猪伴有精神沉郁、脱水、眼窝下陷、厌食、消瘦和衰竭。症状的轻重与年龄大小有关,年龄越小,症状越重。剖检可见小肠肠壁变薄,呈透明状,肠系膜淋巴结水肿、出血,肾脏有出血点。
所选两类疫苗均为目前市场上所售的中高端产品,通过试验结果可以看出,此次流行性腹泻病毒致病性较强,对照组死亡率最高,7日龄内死亡率为74%,总死亡率达85.1%;基因缺失苗的免疫效果优于TB二联苗免疫效果,而两者联合后免疫效果最好,7日龄以后死亡率仅有3.7%。采用反饲效果比疫苗单用效果稍微好一点,总死亡率达到35.7%。
五、结论
通过以上试验,可知产前70天注射TB腹泻特制二联灭活苗,产前40天加强1次,产前60天免疫PEDV基因缺失苗,产前40天加强1次的免疫方案对猪群能够产生有效的免疫保护。
对中大猪、成年母猪发生该病时,要采用停食或大幅度限食,停食时间可持续2~3天。在停食期间为了防止患猪脱水,可在食槽内添加一些补液盐,有助于降低死亡率。2~3天后患猪开始逐渐恢复采食,投喂的饲料量要逐步增加,一般经过3~7天康复。
该病是由冠状病毒引起的,目前尚无有效的治疗药物,但可以使用一些药物来减轻腹泻的症状,如口服杨树花口服液或硅铝酸盐配合乙酰甲喹(痢菌净)粉进行治疗。对个别腹泻严重的患猪可肌内注射猪干扰素、白细胞介素或鸡新城疫I系苗,配合博落回注射液或阿托品注射液等药物,可有效控制腹泻并降低死亡率。由于腹泻易造成猪脱水死亡,为了降低仔猪的死亡率,可对患猪及时补充电解质和水分(可通过直接饮水、腹腔注射或静脉注射等方式)。
此外,仔猪对温度的反应非常敏感,冷热刺激引起仔猪腹泻,特别是低温寒冷或高温潮湿,猪舍的保温效果不好或湿度过高都会引发猪流行性腹泻。所以,我们要综合考虑才能彻底做好猪流行性腹泻的防控工作。
(作者联系地址:山东省临沂市沂水县畜牧局 邮编:276400)
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