东方鲎养殖技术

一、东方鲎养殖技术

1.东方鲎养殖池的建造

(1)室内养殖池

一般用水泥池(3.5米X4.5米X1.2米)，池底最好铺细沙，这样既适合东方鲎的生活习性，又可避免粗糙池底磨破鲎的外壳，致感染而引起死亡；但铺沙之后，底部残饵、污水排除较困难。为保证池水氧气充分，除每天更换部分新水之外，还可采取开启海水龙头击水增氧等措施。

(2)室外土池

可降低成本，场地为沙泥底质，圈养在中上潮带。也可装有进出水的闸门，定期排放，在纳潮进水时，还可带来不少活饵料，在冬季水温降到10℃左右，鲎即埋人泥沙中御寒越冬。

2.投铒

为使东方鲎能耐受多次抽血，保障它的健康，必须投铒喂养。

(1)饵料

①鲜活饵料鲎最喜爱吃如缢蛏、牡蛎、海水小杂鱼等，其中以缢蛏、牡蛎为最佳。

②冷冻饵料

每年在渔汛期，将新鲜饵料存人冷库，以备日常投喂，冷冻饵料必须新鲜，待冰融化后，用海水冲洗干净。若杂鱼个体太大，要切碎投喂。

(2)投饵量

东方鲎的摄食量受水温的影响很大，水温在20—28'E时，食欲最旺盛；水温在20'E以下，摄食量逐渐减少，低于15C时，几乎不摄食，因此，投饵量要根据水温变化和上次投饵残剩多少而定，一般成鲎每天摄食30—40克牡蛎肉或小杂鱼。

3.管理

投入的饵料，一定要用海水冲洗干净。若室内饲养，每日清晨要将残饵排除(可用橡皮管虹吸)，再打开阀门排水，换水量为每天30％一50％，夏季每周要洗刷池子，全部换水1次。

东方鲎喜欢温暖，冬季抽血制试剂必须提高水温至2012左右，使鲎能正常摄食，所以必须装置增温设施。

二、东方鲎试剂制备

1.器皿的严格消毒

所有与鲎血细胞接触的玻璃器皿，都要用清洁剂处理，用蒸馏水洗净、烘干。然后浸泡在硅烷化试剂中半小时，用蒸馏水洗净，再用注射用水冲洗1次，经2512干烤半小时后备用。

2.采血

先将鲎体表洗净，然后用1％碘酒70％酒精消毒胸部与腹部联接的关节处，用适宜的注射针头(一般用18G为宜)直接从关节处插至心门，蓝色血液即自行流人接收瓶内。瓶中先适量加些抗凝剂(茶硷和咖啡因——注射用品)，浓度为0.02摩尔/升的3％氯化钠溶液，用0.05摩尔/升的三羟甲基氨基甲烷一盐酸缓冲液调至pH7.2左右，均需无菌无热原条件下制备。轻微震摇混合，当流人血量达到1：1时即可，为保证饲养鲎长期存活，每次每只鲎抽血80—100毫升，每年能抽4—8次www.nczfj.com/。

3.鲎血细胞的分离洗涤

可用下列两种方法处理：

其一，与抗凝剂混合的鲎血，低温(10C左右)静置48小时，使鲎变形细胞自动沉降，将血浆弃除，用洗涤液洗3次(洗涤液配制：3％氯化钠溶液，用0.1N的氢氧化钠液调整pH值至8，在无菌无热原下制备)。根据收集的变形细胞体积，按1：3比例加人0.9％氯化钠注射液，用无菌操作将变形细胞研磨2小时，再把细胞液置冰箱中崩解24小时，离心分取细胞溶解物。

其二，把与抗凝剂混合的鲎血，用离心机以1000转/分的速度离心10分钟，抽弃上层清液，加入30毫升洗涤剂，使血细胞混悬。把混悬液离心洗涤，抽弃洗涤液，剩下鲎的血细胞，按l：3体积比例加入无菌无热原的蒸馏水(pH7.2)，剧烈振摇，置冰箱中48小时，离心分取细胞溶解物。

4.溶解物的制备

取2份体积分析纯的氯仿和1份体积的鲎血细胞溶解物混合，冰冻冷却，时时振摇，2小时后转移到经热原处理的分液漏斗内，分出细胞溶解物。按其体积每100毫升加入l摩尔/升氯化钙，1摩尔/升硫酸镁，3％氯化钠溶液3—5毫升，使含钙和镁量达到0.03—0.05摩尔/升，分装冷冻干燥，即为鲎试剂的成品。