20世纪80年代中期,大连水产学院王子臣教授等为改变我国鲍经过多年养殖品质下降、病害频发的状况,采用生物、化学、物理等多种方法诱导鲍产生多倍体并获得成功。目前鲍三倍体的诱导率可达67%,到2001年已生产数百亿粒三倍体苗,在世界上率先实现了鲍多倍体苗种的规模化生产。同时,鲍四倍体的诱导率业已达到50%。鲍的多倍体个体具有生长速度快、抗病力强、个体大等优点,具有明显的增产效果,极具推广价值。下面笔者简略介绍一下获得鲍多倍体的三种技术方法,供广大养殖户、特别是鲍育种生产户参考。
1.水压法
以皱纹盘鲍的受精卵为例:在卵受精后7分钟及22分钟用200千克/平方厘米的静水压力处理5分钟,可分别获得抑制第一极体释出后形成的三倍体和抑制第二极体释出后形成的三倍体,诱导率均在60%以上。应注意:当压力大于400千克/平方厘米时受精卵的畸形率明显增加,诱导效果不好,因此应严格控制静水压力和加压时间(压力设备可联系厂商购买)。
水压法对胚胎有轻度的损伤,其缺点是需要专门的压力设备,成本较高。
2.温度法
低温法以皱纹盘鲍为例:卵受精后12分钟,在3℃水温下浸泡受精卵15分钟,可获得抑制第一极体释放后形成的三倍体;卵受精后32分钟,在3℃水温下浸泡受精卵15分钟,可获得抑制第二极体释放后形成的三倍体。三倍体诱导率均可达70%~80%。
高温法皱纹盘鲍的卵在受精后7分钟用35℃的高温水浸泡3分钟,可获得抑制第一极体释放而形成的三倍体;受精后22分钟可用35℃高温水浸泡3分钟,可获得抑制第二极体释放而形成的三倍体。两者的诱导率分别可以达到50%~70%、60%~80%。
利用高温或低温均可抑制极体生成。本方法具有设备简单、成本低廉等优点,但受精卵对温度休克较为敏感,成活率常偏低。
3.细胞松弛素B诱导法
本方法是目前海产贝类多倍体培育最常用的方法之一,其诱导率较高,最高可达100%。其缺点是药物价格昂贵,直接接触对人体会产生毒副作用。细胞松弛素B的适宜温度与水温有关。对于皱纹盘鲍,在20℃水温下的适宜浓度为1毫克/升~2毫克/升。受精卵经细胞松弛素B浸泡处理后,还需要用0.01%的二甲亚矾溶液彻底清洗,洗涤时间30分钟。诱导率可达到60.9%~81.0%。另外,还可用6-甲基氨基嘌呤、咖啡因等药物浸泡受精卵,也可获得多倍体。
总之,育种生产不是简单的换水与投饵的重复,更不是投入与产出的迭加,它需要我们把握育种过程中每一个细节,用心去观察、去摸索、去研究。只要把握住了生产细节,搞好鲍育种生产对每一个养殖户来说都不会是什么难事。
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