刘海龙
(黑龙江农垦齐齐哈尔管理局查哈阳农场畜牧科,黑龙江齐齐哈尔162116)
1 材料与方法
1.1 材料
主要仪器:轮转式切片机(YD-1508B,浙江金华益迪医疗设备厂),生物显微图像分析软件(复日FR- 988,上海复日科技有限公司),电热恒温培养箱(DRP- 9082型,上海森信实验仪器有限公司),恒温摊片、烤片机(TK- 218型,湖北孝感市泰维电子设备有限公司),冰箱,(BCD - 216YH,青岛海尔股份有限公司),包埋盒、盖玻片。
主要试剂:苏木素、伊红、1%盐酸酒精和碳酸锂、二甲苯、石蜡、树胶、APES防脱片剂,60%、70%、80%、90%、95%、100%梯度乙醇。
1.2 方法
90日龄籽鹅处死后立即打开腹腔,观察各免疫器官的形态、位置,测量其大、小、长、短,并采取免疫器官各组织标本,用甲醛液固定,60%、70%、80%、90%、95%梯度乙醇进行脱水,石蜡包埋、然后切片,厚度5~7μm。HE染色(脱蜡、染核、染胞质、脱水、透明、封固),观察免疫器官的组织结构。
2. 结果
2..1胸腺
胸腺表面包有薄层被膜,被膜结缔组织伸入其内部形成小叶间隔,将实质分成许多大小不等的胸腺小叶,每一小叶由皮质和髓质组成。由于小叶间隔不完整,故相邻小叶的髓质往往相连。
2..1.1胸腺皮质
以上皮细胞为支架,间隙内含有大量胸腺细胞和少量巨噬细胞等。由于细胞密集,故着色较深。
胸腺上皮细胞有多种类型,并且存在种间差异,分布于胸腺的不同部位,构成不同的局部微环境。一般认为胸腺皮质有两种上皮细胞:①扁平上皮细胞,又称被膜下上皮细胞,位于被膜下和小叶间隔旁,与结缔组织相邻的一侧呈扁平状,而另一侧有一些突起,彼此以桥粒相连。有的扁平上皮细胞的胞质内含有一些内吞的胸腺细胞,这种上皮细胞称为哺育细胞。扁平上皮细胞分泌胸腺素胸腺生成素等。②星形上皮细胞,即上皮性网状细胞,细胞多分支状突起,突起间以桥粒相连成网。该细胞能用诱导胸腺细胞发育分化。
胸腺细胞,即下细胞的前身,密集于胸腺皮质内,占皮质细胞的85%~90%。淋巴干细胞进入胸腺后,从皮质浅层向深层迁移并逐步分化,其中95%左右的胸腺细胞在分化过程中凋亡,然后被巨噬细胞吞噬清除。
2..1.2胸腺髓质
染色较淡,但与皮质界限不明显。含大量上皮细胞和一些T细胞、巨噬细胞、交错突细胞和肌样细胞;也含少量肥大细胞、有粒细胞、B细胞、浆细胞、成纤维细胞和脂肪细胞等。
髓质内也含有两种上皮细胞:①髓质上皮细胞,呈球形或多边形,胞体较大,细胞间经桥粒相连,间隙内有少量T细胞。该细胞是分泌胸腺激素的主要细胞。②腺体小体上皮细胞,呈扁平状,构成胸腺小体,又称Hassal氏小体。小体大小不一,散在于髓质中,由上皮细胞呈同心圆状包绕而成。其周边的上皮细胞较幼稚,胞核明显;内侧的上皮细胞较成熟的胞质内含较多角蛋白,胞核渐退化;中心的上皮细胞则已完全角质化,细胞强嗜酸性,有的已破碎呈均质透明状;中心还常见巨噬细胞或嗜酸性粒细胞,胸腺小体虽然功能不明,但缺乏胸腺小体的胸腺不能培育出T细胞。
2..2腔上囊
又称法氏囊,其结构与消化道相似,也分黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜。在黏膜固有层内含有许多淋巴小结样结构,称为腔上囊小结,简称囊小结。有些部位的黏膜上皮与囊小结直接相连,这种上皮具有摄取和转运抗原的能力。
腔上囊是鸟类特有的产生B细胞的中枢免疫器官。但近年来在腔上囊背侧近导管开口处,发现一片弥散淋巴结,主要含T细胞,属胸腺依赖区。因此,腔上囊还可能具有周围免疫器官的功能。
2..3脾
2..3.1被膜和小梁
脾的被膜由一层较厚的富含平滑肌和弹性纤维的结缔组织构成,其表面覆盖有间皮。结缔组织伸入脾内形成许多分支小梁,与伸入的小梁互相吻合,构成脾实质的支架。小梁内有许多小梁动脉和静脉。被膜和小梁内的平滑肌及弹性纤维伸缩,可以调节脾的血量。
2..3.2白髓
主要由密集的淋巴组织构成,包括动脉淋巴鞘和脾小结。动脉淋巴鞘。主要由密集的T淋巴细胞和交错突细胞等环绕动脉而成,动脉淋巴鞘属胸腺依赖区,当发生细胞免疫应答时,此区明显增厚。脾小结。即淋巴小结,分布在动脉周围淋巴鞘的一侧。主要由B淋巴细胞构成,与淋巴结内的淋巴小结相似,也有明区、暗区和帽,但脾小结内有中央动脉分支。
2..3.3红髓
主要由脾索和脾窦组成,因含大量的血细胞,新鲜脾的切面呈红色,故称红髓。分布在被膜下、小梁周围和白髓之间。脾索。与脾窦相间排列,是一些富含血细胞的互相吻合的淋巴组织索。索内除含有淋巴细胞外,还有大量的血细胞、巨噬细胞和浆细胞,淋巴细胞主要为B细胞。脾窦。位于脾索之间,形状不规则,相互吻合成网,具有一定的伸缩性,扩张时比脾索宽,收缩时难以分辨。脾窦周围有较多的巨噬细胞,其突起可以通过内皮间隙伸向窦腔。
2..4哈德氏腺
哈德氏腺是复管泡状腺,腺体表面的结缔组织被膜伸人实质,分割成大小不同的腺小叶,切面呈圆形或多边形,腺泡汇集成三级和次级收集管,然后通入单一的主导管,腺泡和收集管外均有毛细血管网。主导管纵行延伸于腺体全长。腺泡和导管上皮均由柱状上皮细胞构成。在腺泡和各级导管(排泄管)周围富含淋巴细胞,形成弥散淋巴组织,偶见团索状排列而成的淋巴小结或淋巴索。以哈德氏腺为主的鼻旁和眼旁淋巴组织,亦是禽体非依赖腔上囊B淋巴细胞分化、繁殖的场所。在腺泡和导管周围富含淋巴细胞,形成弥散淋巴组织,偶见团索状排列而成的淋巴小结或淋巴索[养殖网:www.nczfJ.com/]。
3 讨论与小结
通过观察,了解籽鹅免疫器官的组织结构。HE染色观察发现,胸腺小体形状呈圆形、长条形或不规则形,并且大小不一;胸腺实质内主要以上皮性网状细胞为支架,大量的淋巴细胞在此进行分化发育;胸腺细胞的胞质面积所占细胞整体面积的比例较小,胞质中常见线粒体和粗面内质网。法氏囊起源于泄殖腔,囊壁仍保留与消化管相似的四层结构:即黏膜、黏膜下层、肌层、外膜,法氏囊淋巴滤泡形状为椭圆形和圆形,皮质和髓质交界处的形状为椭圆形或不规则形,个别淋巴滤泡中出现了2~3髓质部的现象。脾是体内最大的淋巴器官,在血液循环的路径上,是血液循环一个重要滤器,脾与淋巴结有相似之处,也是由淋巴组织构成,但脾没有输入淋巴管和淋巴窦,有输出淋巴管和大量血窦:脾由被膜和小梁、红髓、白髓组成。哈德氏腺是复管泡状腺,哈德氏腺小叶的直径、腺泡直径和腺泡的数量难以看清。
籽鹅免疫器官对传染性病源提供了非常有效的宿主防御,了解籽鹅免疫器官的组织结构,更好的进行禽病防治。
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