水蛭素的提取方法研究

这方面的实验与应用，多见于国外报道。目前国内采用不多。

1．提取水蛭素的有效部位

水蛭素主要产生于水蛭的唾液里，当水蛭吸血时，将其分泌出来，阻止血液凝固。因而，实践表明，提取水蛭素的最佳部位在头部。I．P．Baskova在比较了从水蛭头部、去头后的体部及整体水蛭中提取的水蛭素后发现，从头部得到的水蛭素活性最强，从整体得到的活性只有头部的土／3，而从去头后的体部得到的是伪水蛭素(pseudohru山n)，其化学性与水蛭素相同，但无抗凝活性。

2．提取水蛭素的方法

(1)用能与水混溶的有机溶剂提取：从水蛭头部提取：即将水蛭头部剪下，切成碎片，以其10倍体积的40％丙酮一水提取2次，每次30min。合并提取液，再加1／2体积的809《丙酮一水，加冰醋酸调至pH4．3—4．5，离心除去沉淀，上清液用氨水调至pH6．0，在40~C下，减压浓缩至原体积的l／10。再用10％三氯醋酸调至pHl．8。最后以10倍体积的冷丙酮(—5。C一0。C)将粗水蛭素沉淀析出。

从水蛭整体中提取：即将80％的冷丙酮加到磨碎的水蛭粉中，搅拌10min后，加氯化钠(0．2—0．5mol几)和三氯醋酸(0．1—0．4mol／L)，使PH值达到2．5—3．5，搅拌30—60min，倾出上清液，沉渣再用1／3体积的上述80％丙酮提取1次。合并2次提取液，加入2倍体积的冷丙酮(—10~C)，沉淀析出粗水蛭素。

(2)用水提取：

将水蛭磨成细粉，加入0．5mol几氯化钠液，室温搅拌30—60min，调成pH2．0—2．5后，升温至70'C，搅拌15min离心去渣。上清液调至pH6。5—7．0，加入l。5倍体积的乙醇，去沉淀。上清液在30~C一40~C，真空浓缩至原体积的1／20左右。向浓缩液中加入等体积的丙酮，去沉淀，再加入4倍体积的冷丙酮(—5~C一0信C)，将粗水蛭素沉淀析出。水蛭素的分离，多用离子交换、凝胶层析和等聚焦等方法。如作进一步研究，可以分离提到纯晶。