毛滴虫病引起牛低育的临床症状、诊断及防控

韩贞珍

（辽宁省葫芦岛市动物疫病预防控制中心125100）

1临床症状

牛群中有胎儿三毛滴虫介入后生育力严重下降，后发展为返情、产犊间隔时间延长，因不能妊娠被淘汰牛的比例上升，出现子宫积脓和妊娠早期流产时提示低育。未孕牛常在返情时出现阴道脓性分泌物，直肠检查触摸子宫时常引起阴门流出分泌物，分泌物中能检测到活动的胎儿三毛滴虫。同样，因胎儿三毛滴虫感染所致子宫大量积脓，脓汁稀薄、无气味、灰白色并且含有大量的胎儿三毛滴虫。

患牛的临床症状为妊娠并能妊娠至足月，没有感染发生。病牛屡配不孕，但是没有明显的感染症状；发情规律或不规律。不能妊娠并发展成子宫内膜水肿，带有絮状的粘液性分泌物。患牛妊娠，但是在妊娠的第2~4个月流产，发展成子宫积脓并且无发情周期。

有的流产发生在妊娠的第2~4个月，妊娠第4个月后很少发生流产。妊娠晚期流产时，能在绒毛膜、胎肺和胎儿的胃肠道内检测到胎儿三毛滴虫。由于生长延迟，所以流产胎儿比相应的妊娠时期正常胎儿小。流产的病例，胎儿呈灰白色，并且连同胎膜一起被排出，没有化脓症状，并且在羊水中很容易找到毛滴虫。病牛流产后，寄生虫很快（通常在7天内）从阴道分泌物中消失。

2诊断方法

2.1诊断样品

奶牛胎儿三毛滴虫的诊断最好能从子宫脓汁、阴道分泌物、子宫颈粘液或者流产材料中找到胎儿三毛滴虫。最好的样品是胎膜或流产胎儿的器官。交配感染后，感染的消除速率各不相同，因此未能找到微生物并不一定意味着早期没有该病原。不要用被粪便污染的物质作为样品检测，因为这种样品中可能含有非致病性的类似毛滴虫样的微生物。

公牛毛滴虫病需检查包皮的刮下物和包皮洗液。传统的采样方法是，用力刮包皮黏膜，尽可能多地获得包皮垢。也有人建议，诊断毛滴虫病时须用力刮包皮采样。将公牛深度麻醉，用大约50毫升磷酸盐缓冲液冲洗其包皮，检测冲洗液（www.nczfj.com），对诊断毛滴虫病很可靠。最好在公牛性行为后5~10天进行检测，以便检测到更多的毛滴虫。

2.2检测虫体

任何可能包含毛滴虫的材料都应该小心处置，因为毛滴虫很脆弱，且死亡后迅速降解。如果对采集到的样本处理不当，在检测时虫体将会消失。多种培养基可以用来培养毛滴虫，其中有克劳森培养基、黛蒙德氏培养基、InPouchTF系统。培养后能观测到虫体。

现场培养用的InPouchTF系统由1个透明柔韧的塑料小袋组成，小袋分2层。上层含有特殊培养基，样品接种于此。现场采集的用于直接接种到培养袋中的样品，应是经包皮刮擦技术采集的。样品与培养基充分混合后，挤入小袋下层，然后将小袋密封并在37℃条件下培养。可以直接将塑料小袋放显微镜下检查毛滴虫。在放大200~400倍的视野中观察到活动的毛滴虫可初步诊断。经常会在角落以及下半部近底部或小袋的接种层观测到毛滴虫。通过虫体的大小、鞭毛和波状膜来确定毛滴虫。对于从公牛收集到的样品，InPouchTF系统的灵敏度估计为84%~96%，而黛蒙德氏培养基的灵敏度为78%~99%，特异性达到100%。

近年来PCR检测法也用于毛滴虫的检测。使用PCR检测法可以区别牛阴茎包皮陷窝中是胎儿三毛滴虫感染还是粪便毛滴虫污染，可用于鉴别初步培养的胎儿三毛滴虫，还可以用来直接诊断现场采集样品中的毛滴虫，并且比只采用培养法的灵敏度高。但是，采集到的样品必须尽快进行检测，保存会迅速降低灵敏度。

3防控措施

淘汰公牛，并用人工授精代替自然交配；对母牛采取灵活的分组管理，合理使用公牛；对公牛和母牛进行治疗或疫苗接种。

通过人工授精控制毛滴虫感染的基础是假设母牛在自行康复，并且如果用健康公牛的精液输精代替自然交配，健康母牛不会发生感染。在所有的防控方法中，淘汰牛群中感染的公牛和采集未感染公牛的精液进行人工授精是最有效的方法。采用人工授精时，至少需要在同一个配种季节内对母牛完成配种，最好是在2个配种季节。在采用人工授精方法的起初阶段，妊娠率较低。