【名称】兔轮状病毒感染(Rabbit Rotavirus Infection)
免轮状病毒感染是由兔轮状病毒引起的30--60日龄仔兔的一种以严重腹泻为特征的急性肠遗传染病。
病原 本病毒归于轮状病毒属。病毒直径为65 nm,双层衣壳。中央为一个电子致密的六角形核心,直径37—40 nm。兔轮状病毒对乙醚、氯仿和去氧胆酸钠有抵抗能力;对酸和胰蛋白酶稳定。56℃,30 min使其感染力降低2个对数。粪便中的病毒在18—20℃室温中,经7个月仍有感染性。
各种动物的轮状病毒之间有一个存在于内衣壳中的共同抗原,可用补体结合,免疫荧光、免疫扩散、中和试验等方法加以证明。已发现兔轮状病毒的R-2和R-3毒株与牛轮状病毒林肯毒株有免疫荧光交叉作用,但没有交叉中和作用。兔轮状病毒的 Ala、C11R~2 、R~3。等许多毒株属于轮状病毒A群血清3型,
兔轮状病毒可在MA 104和LLC—MK2传代细胞中生长,并在感染72 h后细胞出现病变。由于胰蛋白酶能够促进轮状病毒在细胞培养物内感染和增殖,所以可应用胰蛋白酶处理兔粪以提高轮状病毒分离率。将肠内容物或粪便用10ug/ml胰蛋白酶37℃处理30min后,接种于MA104细胞,这样更容易分离到病毒。
流行病学 轮状病毒一般以突然发生和迅速传播的形式在兔群中出现。兔的发病率在90%—100% 之间,通常呈散发性爆发,大多数呈隐性感染。出现急性临床症状的病例主要于30--60日龄仔兔。恶劣的天气,饲养管理不佳,卫生条件差是诱发本瘸发生的主要外界因素。由于患病后,病毒在个体粪便中存在时间不清楚及个体对本病毒的免疫力不完全,所以本瘸的发生率和再感率较高,正是通过病毒的持续存在,致使兔群经常有本病发生。
症状 本病的潜伏期是19—96 h,随后出现体温升高、腹泻、以日龄小的仔兔最为易感,症状也较为严重,可能出现粘液或血样腹泻,或伴有致病性细菌下痢,大约60%的病兔是由于脱水和酸碱平衡失调而死亡。
在吃全奶的仔兔中,粪便常呈鲜明的黄色到白色,其他仔兔粪便可能呈水样、棕色、灰白、或浅绿色、内含血样液体和牯液,粪的颜色似取决于饮食,随着病程的延长,可导致脱水,体重明显降低,约在腹泻4—2 d后死亡。
本病毒感染主要局限于小肠和结肠,小肠和结肠表现为明显的扩张、粘膜出血斑点。
病毒能感染肠绒毛上的吸收上皮细胞,而非隙管细胞。受感染后柱状上皮细胞脱落,绒毛缩短,腺管细胞为了不断补充吸收上皮细胞而出现增生。残存的上皮细胞胞浆空泡化,在绒毛内的吞噬细胞中可见到病毒颗粒。
诊断 为了诊断兔轮状病毒感染,可采用各种方法进行全面诊断。因为兔的轮状病毒感染很普遍,而临床发病及其血清中的抗体滴度又无明显的线性平行关系,因此,测定病兔发病前后双份血清中IgM含量,有较大的临床意义。
病兔在腹泻时随粪便排出大量病毒,因此可利用粪便和肠的内容物的滤过液组织培养来分离病毒。
电镜观察:取肠内容物或采取腹泻粪便,按照常规病毒粗提纯和电镜技术处理样品,用磷钙酸负染后镜检。根据轮状病毒的特征性形态进行识别。
病毒分离;取肠内容物研磨,用PBS (0.15 M氯化钠[https://www.nczfj.com/],0.15 M磷酸缓冲液pH 7.2)作10%稀释,离心力1500g,20 min;取上清液再离心,离心力20000g,30min,上清液用滤膜过滤后,再离心已滤过的上清液,离心力100000g,2h,取沉淀用PBS稀释后做为接种物。在37℃条件下接种物用10ug/ml胰蛋白酶消化作用30 min,接子长成单层的MA 104细胞。接种72 h后细胞开始变圆,边缘不清,融合,最后破碎。利用免疫荧光和电镀技术检查病毒在细胞内生长情况。
中和试验:主要用于鉴别兔轮状病毒毒株。
除了兔轮状病毒外,还可能检出另外一种或几种病毒或致病菌,如腺病毒、大肠杆菌、沙门氏菌等。如果在腹泻中发现病毒性的混合感染,则这种发现对采取适宜的控制,治疗和预防措施是有用的。
防制 由于兔轮状病毒引起的仔兔的腹泻是严重的,往往导致死亡,因此,充分利用母兔的初乳,在肠道中发挥其免疫功能,提高肠道抵抗疾病的能力。初乳一定要含有高滴度扰轮状病毒的抗体。为了使初乳更有效地发挥其功能,应在易感年龄的关键期间每天喂饲,也可用同种的高免抗血清来代替初乳。
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