夏芝玉1,耿 松2
(1.江苏省徐州市沛县龙固镇农技推广服务中心,江苏徐州221613;2.江苏省徐州市彭祖园管理处,江苏徐州221000)
大肠杆菌病是由大肠埃希菌引起的细菌性人畜共患病。大肠埃希菌俗称大肠杆菌,是1885年发现的,在相当长的一段时期内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌病对人和动物有致病性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重肠炎、败血症、肠毒血症、组织器官炎症,导致畜禽生长发育受阻和死亡,造成较大经济损失。
1 病原
培养特性:本菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,最适生长温度为37℃,最适生长pH值7.2~7.4。S型菌株在肉汤中培养18~24h,呈均匀浑浊,管底有黏性沉淀,液面管壁有菌环。在营养琼脂上生长24h后,形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,直径2~3衄;麦康凯琼脂上形成红色菌落;在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落;在SS琼脂上一半不生长或生长较差,生长者呈红色。部分致病株在绵羊血平板上呈β溶血。
生化反应:本菌能发酵多种碳水化合物产酸产气。大多数菌株可迅速发酵乳糖,仅极少数迟发酵或不发酵。约半数菌株不分解蔗糖。几乎均不产生硫化氢,不分解尿素。吲哚和甲基红试验均为阳性,VP试验和枸橼酸盐利用试验均为阴性。大多数菌株发酵葡萄糖产酸产气;发酵麦芽糖、甘露醇、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-木糖、海藻糖;多数菌株能利用卫矛醇。少数菌株利用侧金盏花醇;对水杨苷、D-山梨醇、棉籽糖发酵及七叶苷水解能力不定。大多数菌株不能利用间肌醇。赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶不定,苯丙胺酸脱羧酶、精氨酸双水解酶均为阴性。不产生硫化氢,明胶穿刺大多数菌株显示运动力,但22℃条件不能液化明胶。
体内分布、毒力因子(致病性):大肠杆菌在人和动物的肠道内,大多数于正常条件下是不致病性的共栖菌,在特定条件下(如侵入场外组织或器官)可致病。但少数大肠杆菌与人和动物的大肠杆菌病密切相关,属于病原性大肠杆菌,正常情况下存在于健康机体。与动物疫病有关的病原性大肠杆菌可分为5类:产肠毒素大肠杆菌、产类志贺毒素大肠杆菌、肠致病性大肠杆菌、败血性大肠杆菌及尿道致病性大肠杆菌。致病机理相对清楚的是前两类。
抵抗力及药物敏感性:大肠杆菌对外界不利因素的抵抗力不强。其培养物在室温下可生存数周,在土壤和水中可达数月。对高温抵抗力较弱,一般加热到60℃15min即可被杀死,在干燥环境下也容易死亡,但对低温有一定的耐受力。对一般的化学消毒药品都比较敏感,对强酸、强碱较敏感,其耐受pH值4.3~9.5。此外较能耐受胆盐,能抵抗一些染料(如煌绿等)的抑菌作用,这些特性可应用于选择性培养基。
2. 发病情况
2016年4月沛县龙固镇某鸡场购进6000羽1日龄白羽肉雏鸡。进雏4天就出现呼吸道症状,打喷嚏、咳嗽。第八天死亡率5%,养殖户按慢性呼吸道病治疗3天,第十一天死亡数持续增加,未有改观,死亡率达10%,遂送至本站就诊[养殖网:www.nczfJ.com/]。
3 临床及剖检变化
病鸡精神萎顿,羽毛蓬乱,翼下垂,食欲不振,缩头闭眼或昏睡或蹲于一角或伏卧,怕冷聚集在炉子周围。有腹泻现象,排黄白色、淡黄色的稀粪,有的带有血色,雏鸡有的脐部肿大,呈现红色或青紫色,有的脐带周围红肿并有水样液体,泄殖腔周围羽毛被粪便污染。
剖检病死鸡可见气囊浑浊肥厚,有黄色干酪样胶胨样物体。肝脏肿大,质地变脆,有白色坏死斑,表面有白色浑浊的纤维素样物质;脾脏充血,胰腺有出血小点,肾脏充血出血。并出现心包炎、肝周炎。出现心包炎、肝周炎病变的鸡占病死鸡的80%。结合以往经验初步诊断为大肠杆菌病。
因镇畜牧兽医站不具备实验室检查条件,遂将发病鸡只于当日送至县兽医站实验室进行确诊。
4 实验室诊断
细菌培养:无菌采取病鸡的心、肝、脾、肾,分别接种在普通琼脂和麦康凯琼脂培养基上,置于37℃恒温箱内培养,经过24h后,可以见到,在普通琼脂培养基上生长有许多边缘整齐、光滑、隆起的菌落,在麦康凯琼脂培养基上,有许多边缘整齐、光滑、隆起的红色菌落。从麦康凯琼脂培养基上挑取单个菌落用革兰氏染色后,在油镜下观察,可以见到多个短杆状、单个散落的红色菌落。
药敏实验:用常规纸片法测定分离菌对药物的敏感性,结果对庆大霉素、丁胺卡那霉素高度敏感,对泰乐菌素、青霉素中度敏感,对氧氟沙星、环丙沙星低度敏感。
根据发病鸡群的临床症状、剖检病变和实验室检查结果综合判定,确诊该鸡场发病鸡群感染大肠杆菌病。
5治疗
对病死鸡进行焚烧,撒上熟石灰作深埋处理。将感染鸡隔离治疗,庆大霉素50001U/只饮水,2次/天,连续5天。严重病鸡每天胸部肌肉注射黄芪多糖注射液0. 2mL/kg,连续3天。为提高鸡群的抗病能力,在饲料中添加VC、VE等多种维生索。对圈舍采用物理和化学方法进行消毒,清扫、清除污物,用o.3%过氧乙酸对鸡舍内外环境及用具等进行彻底的消毒,1次/天,连续10天。加强通风,因春季昼夜温差较大,注意防寒保暖,同时降低饲养密度。
治疗3天后,除有极少病情严重的鸡死亡外,再无新发病鸡只,采食量上升。1周后回访,全群正常。
6讨论
本病发病的时间很早与苗鸡质量有一定关系,因为种鸡场发生过大肠杆菌病,所以种蛋或苗鸡难免会受到污染造成苗鸡发病。进雏的第一天就进行新支二联苗(新城疫和传染性支气管炎)的免疫接种,第四天就出现症状,与免疫接种的应激也有一定的关系。发病鸡场养鸡多年并且每次鸡群出栏后消毒不彻底。由于成鸡销售迟缓,因此没有坚持全进全出制度,同一鸡场内有不同龄期的鸡混合饲养,容易造成疾病的混合交叉感染。进雏后几天连续下雨,鸡舍内通风不良,温度和湿度不稳定也是发生本病的诱因。该鸡场是相对开放的鸡场,进出人员和车辆较多容易造成疾病的传播。发病鸡场的水源不清洁,经检测每500mL水中有大肠杆菌500个。因为鸡场周围的环境都是泥地,所以每次清洗消毒的污水都渗到地下造成水源污染。雏鸡质量要好,选择信誉好,质量有保障的种鸡场购买。尽快购买专业的运输车,减少苗鸡运输过程中受到污染,减少疾病感染的机会。清洁环境,每次鸡出栏后要彻底的消毒,先用清水清洗鸡舍再用5%的烧碱消毒,6h后用清水冲洗干净,再用百毒杀消毒,进雏前再消毒一次。鸡场内不同鸡舍要合理安排进雏时间。尽量做到全进全出,减少交叉混合感染的机会。加强通风换气与温湿度的控制,降低舍内致病菌的含量。饮水水源要清洁,远离鸡场200m以上,饮水可用漂白粉消毒。鉴于该鸡场相对开放,可以在鸡场的大门口设消毒室和消毒池对来往的人员和车辆进行消毒,严禁非工作人员接近鸡舍。鸡场周围的环境、鸡场用具等要定期消毒。制定合理的带鸡消毒制度。
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