(一)白僵菌培养
白僵菌属半知菌纲线菌目淡色菌科白僵菌属。菌种的来源,由僵蚕尸体上的白僵菌孢子,经分离选取优质单株菌落移植于斜面培养基上,在25—28℃的恒温下进行培养。经10天左右,将提纯分离所得的纯种在5℃低温下保存用于扩大培养。白僵菌的培养过程,用下列公式简示:
带活孢子的僵蚕尸体(分离提纯)
斜面培养基接种一级菌种(固体发酵培养)
二级菌种(蚕体复壮)
三级菌种(供生产接种用)
(二)1—4龄桑蚕的饲养及防病
1—4龄蚕的饲养要特别加强蚕体、蚕座的消毒,防止小蚕发僵蚕病死亡。对僵蚕病的防治,除蚕室、蚕具消毒外,应重点抓住两个方面,即杀灭病源;切断感染途径和控制温度等发病条件。
(1)消灭感染源
病蚕、蚕沙要及时处理,旧簇具必须烧毁,蚕沙要挖坑沤制堆肥,商品僵蚕要及时烘干灭菌,菌种僵蚕要密闭保管,蚕室、蚕具要清冼消毒,防止病源体飞散传染。
(2)使用防僵药剂
防僵药剂的使用,是有效防止白僵菌侵入蚕体寄生的办法。一般每个龄期使用二次防僵药剂,如发现小僵蚕,每天使用一次防僵药,但眠中停用。
(三)5龄响食后接菌
(1)准备
在蚕发育至5龄响食后首先要做好蚕补湿准备工作,调节湿度以求接菌后迅速达到一定湿度状态,以使白僵菌良好发育,迅速进入蚕体。
(2)菌液调制
接菌之前测定菌种僵蚕的孢子数,做发芽试验测定菌种的毒力,按照孢子数的多少和菌种毒力的大小,确定合理的菌种加水量。按照所需水量先取三分之二,把菌种僵蚕浸入水中充分擦洗,洗到僵蚕体上白色粉末全部洗落为止,用滤纱滤去蚕组织及粗碎片,再用余下的水冲洗滤纱及蚕体组织,使孢子充分洗落,最后用铜丝筛过滤(www.nczfj.com/),即可使用。菌液在接菌前1—2小时配制好。洗落孢子的僵蚕晒干后仍能人药。
(3)菌液浓度
菌液浓度根据菌种的毒力,不同品种的蚕五龄期的长短,接菌当时的温湿度条件灵活掌握。一般掌握在白僵菌孢子数每立方毫米3.6—6万个,干旱季节要浓,多湿季节要淡。
(4)接菌量
每0.11平方米蚕座面积喷菌液40—45毫升。干燥季节可以适当增加菌液量。
(5)接菌时期
五龄起蚕开叶之后3—5小时。
(6)接菌方法
用专用的农用喷雾器将菌液均匀喷于五龄开叶后的蚕体上,接菌后经10—20分钟给桑叶,16—20小时除沙,以保证有多湿环境,利于白僵菌孢子侵入蚕体,提高成僵率。
(7)温湿度
接菌后,温度保持24—30C,相对湿度保持在90%以上,经过一昼夜,恢复丝茧蚕培育的一般要求。
(8)发病
接菌后经3—3.5天开始出现病斑,首先出现在气门周围,使气门颜色变深,轮廓变大,渐至围绕气门扩大成黑褐色块状斑,周围油迹透明,还有病斑出现在尾部肛门附近或尾角变焦黑等,虫体一般在接菌后5—6天死亡,在适温范围内温度高发病早死亡快,温度低死亡慢。
(9)注意事项
①接菌后至第1次除沙前的16—20小时内必须做好温度、湿度调节工作,春季温度不低于24℃,夏秋季温度不高于30C,相对湿度控制在90%以上。
②初死僵蚕的尸体尚未发红变硬以前,防止30'C以上高温,以减少细菌性烂蚕发生。
③接菌后仍需按照丝蚕培育的规定使用防蝇和防其他蚕病(臼僵病除外)的药剂。
(四)白僵菌留种及僵蚕保护(/tezhongzhongzhi/)
(1)白僵菌留种
白僵菌以上期留种供下期使用,春期留种供夏期使用,以后每期留种供下期使用,最后一期僵蚕分离提纯斜面培养一级菌种,供早春使用。
(2)留种方法
在蚕大批僵死时,选择蚕体大,死亡齐一的刚死的红僵蚕,拾取平摊箧中,推一层厚,以蚕不堆积为标准,以免影响孢子形成。一般6天左右即可使用。
(3)商品僵蚕的保护
蚕大批僵死后,将发红的僵蚕拾起,摊在干净箧中,不要堆得太多,4天后,白色孢子长满全身,进行高温灭菌。在长孢于期间尸体不能翻动,连续阴雨,必须开门开窗,通风透气,防止尸体腐烂。
将拾取的僵蚕进入烘房高温灭菌,在90—100℃高温中烘4—8小时,即能达到杀死白僵菌烘干僵蚕。或将拾取的僵蚕用石灰吸收水分后,晒干或焙干。
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