猪痢疾的症状与实验室诊断及防治

刘　磊1，孔德光2

（1．山东省潍坊市峡山区王家庄街道兽医站，山东潍坊262115；

2.．山东省安丘市畜牧局，山东安丘262100

摘要：猪痢疾是由猪痢疾密螺旋体引起猪的一种以血痢为主的肠道传染病。主要特征为大肠黏膜发生严重的黏液性、出血性和坏死性炎症。在自然条件下仅猪发生，尤以2～4月龄的断奶仔猪最易感染，其他畜禽未见感染发病。主要通过消化道感染和传播，本病尚无疫苗应用，以预防为主。发病时，应用抗生素治疗。

1　临床症状

最急性病猪无明显症状而突然死亡，是猪群开始暴发本病的预兆。最急性病猪往往突然死亡，急性病程1～2天，慢性病猪病程1～2周。急性病猪精神差，食欲减退，粪便较硬且表面附有条状黏液，随后体温升高至40.5～41．O℃左右，粪稀如水样，严重者粪内充满黏液和血液，有的混有脓液或脱落的黏膜碎片，病畜渴欲增加，粪便恶臭，腹部凹陷，起立无力，逐渐消瘦，最后极度衰弱而死。慢性病例病情较轻，下痢，粪中黏液及坏死组织碎片较多，血液较少，病期较长。

2.　实验室检验

2..1　病原学检查

直接镜检：取新鲜粪便（含黏液）或直肠拭子，或刮取病变的结肠黏膜直接抹片，干燥，火焰固定，用结晶紫或稀释碱性复红染色3～Smin，水洗，吸干。镜检时每份样品应制作2张，油镜观察每片最少10个视野。猪痢疾密螺旋体的菌体长度为6～8!1m，呈2～5个疏螺旋状，两端尖锐。当多数视野中至少出现3～5个类似上述的菌体，可判为假定病猪。

组织切片镜检：按常规将病变大肠制成石蜡切片，用结晶紫或姬姆萨染色镜检。若在黏膜表面特别是在腺窝处见到聚集不同数量的类似猪痢疾密螺旋体菌体，多时密集如网状，可作初步判断。

分离培养和鉴定：①材料准备：采取新鲜粪便、大肠内容物或大肠病变黏膜，不要冰冻，立即分离培养。粪便、直肠拭子可置于0.　5mL（0.Olmol/l_、pH值7.2）的磷酸盐缓冲液中，密封后O～4℃保存，3天内处理完毕。两端结扎的结肠段，o～4℃可保存5～7天。分离培养基（胰胨大豆血液琼脂）的配制：胰胨15g，植物蛋白胨5g，氯化钠5g，琼脂15g，蒸馏水lOOOmL，pH值7.3左右。使用前加入盐酸壮观霉素400Vg/mL和5%脱纤马血或牛血。②操作方法：将病料进行直接划线接种于培养基，置厌氧培养器内42℃加以培养，每隔4～6天检查1次，共检查2～4次。病原性猪痢疾密螺旋体呈完全溶血（强β溶血）。溶血区呈条状或一端稍尖的椭圆形斑点（与其他细菌在菌落周围形成圆形溶血区有明显不同），一般不见菌落。当培养条件适宜时，可见到云雾状菌苔。经镜检发现猪痢疾密螺旋体典型形态时，可在无杂菌的溶血区挑取一小块琼脂，划线接种于新培养基上，37℃培养，每隔2天移植1次，一般移植2～4次即可获得纯培养。③致病性测定：致病性测定需用10代以内的菌种，10代以上的菌种毒力逐渐减弱。将血液琼脂平皿上的菌体用生理盐水冲洗，低速离心去琼脂。取2周龄小猪2头，保持饥饿48h。全身麻醉后手术使结肠暴露，先注入200～400mL灭菌生理盐水，用于将肠内容物向后推移。每隔5～lOcm将肠作一道双重结扎，一般可结扎6～10个肠段，每段间隔2cm，不要损伤血管。每个肠段注入5ml。菌液（含5亿个菌），另留一肠段注入5mL生理盐水作为对照。另一头实验猪也接种相同的菌株和菌量，但肠段接种的内容物前后顺序与第一头相反。缝合腹腔，禁食，经48～72h剖检。如接种肠段渗出液增多(3～7mL)，内含黏膜、纤维素或血液，黏膜肿胀、充（出）血，抹片镜检有大量的密螺旋体菌，则判为致病菌株。1头猪可同时测定5～9个菌株。

2..2　微量凝集试验

试验方法。材料准备：V型孔微量板、微量加样器、磷酸盐缓冲液（pH值7.2）、兔血清等。抗原由指定单位供应。试验方法：先将被检血清用含有1%兔血清的磷酸盐缓冲液作10倍稀释，于56℃灭能30min。然后在微量板上每排第一、二孔每孔加入10倍稀释被检血清50μL，第二至六孔每孔加入磷酸盐缓冲液液50μL。从第二孔开始血清作倍比稀释至第五孔（稀释倍数为160倍），最后弃去50μL混合液。每孔加50μL-抗原。第六孔为抗原对照。设阴、阳性血清对照。轻微振荡后，置38℃中，经18～24h后观察结果。

结果判定：根据反应板底部凝集（呈盾状）或不凝集（呈圆点状）判定凝集滴度。血清效价判定，以引起50%菌体凝集的血清最高稀释度表示[养殖网:www.nczfJ.com/]。

3　防治措施

预防本病目前尚无推广应用的疫苗。若猪群一旦发生本病，如数量较少时，除采取严格消毒处理粪便外，可根据情况急宰或淘汰病猪。病猪粪便污染的场地、周围环境、圈舍等，可用1%氢氧化钠或2%来苏尔消毒。如发病较多时，可用抗生素药物进行治疗，如对发病猪群全群投服痢菌净，按0．5一1．Omg/kg饲料比例拌料喂服，连用10天。病猪和同群猪内脏作工业用或销毁，肉尸经高温处理后出场，猪皮消毒后利用，脂肪炼制后可食用。