肉牛运输热是一种应激性综合征,是由于感染多种病原微生物而导致,主要特征是高热以及间质性、大叶性肺炎。病牛主要症状是高热,脓性结膜炎,不停流泪、流鼻液,频繁咳嗽,呼吸困难,并流出泡沫样口涎。通常育肥牛群容易发生该病,也是导致牛群发生死亡病因之一。下面具体来了解一下:肉牛运输热的发病原因 肉牛运输热的临床症状及防治措施。
1、病因分析
一般认为是由于管理不当以及发生应激,使病原体趁机侵入机体而引起发病。大部分病原体为病毒,主要包括牛传染性鼻气管炎病毒和Ⅲ型副流感病毒;还有部分病原为细菌,主要包括曼氏溶血杆菌和多杀性巴氏杆菌。其中Al型曼氏溶血杆菌主要是引起非免疫犊牛发生该病。犊牛健康且没有发生应激的状态下,其呼吸道内本就存在少量的曼氏溶血杆菌。但是犊牛在运输过程中,会导致鼻腔和气管内所含的Al型曼氏溶血杆菌数量增加,并逐渐移动到肺脏而引起支气管肺炎。另外,1岁犊牛在运输过程中,会导致血浆纤维蛋白原含量增加,就表明机体已经受到应激的刺激。犊牛在陌生环境中圈养,同时停止给予饮水和饲料,也能够导致纤维蛋白原含量增加。此外,牛突然更换饲喂含有丰富谷类饲料的日粮时,也非常容易引发呼吸道疾病。
2、临床症状
该病一般具有2-5天的潜伏期。发病初期,病牛表现出精神萎靡,呆立不动或者卧地,食欲不振,体温明显升高,一般可达到40-42℃。被毛蓬松杂乱,鼻镜干燥,体质虚弱,明显消瘦。随着症状的加重,会有黏脓性分泌物从鼻孔流出,且有干涸分泌物覆盖在鼻镜上,将其揭去就能够露出出血面,流泪,眼脓性结膜炎,咳嗽,呼吸困难。部分病牛会排出黏液性稀粪,部分在发病末期还具有神经症状,如阵发性、强直性痉挛。
3、剖检变化及组织病理学观察
对病死牛进行剖检,发现整个肺脏都呈暗红色,质地较硬,如同肝脏,切面呈颗粒状,且比较干燥,切面小叶间质发生水肿、明显变宽,放入水中逐渐下沉,气管内存在泡沫样黏液,气管黏膜发生肿胀、充血,纵隔淋巴结和支气管发生肿大、出血,肝脏、心脏、肾脏颜色变浅,且发生肿胀,而脾脏呈暗红色,也发生肿胀,且质地变软。取病料通过常规石蜡切片,再经HE染色后放在显微镜下观察,发现肺支气管腔内中存在脱落的上皮细胞、黏液以及大量红细胞和嗜中性粒白细胞构成的炎性渗出物,肺组织大面积肺泡壁发生充血,且有所增厚,巨噬细胞、淋巴细胞浸润增生,肺泡腔变得狭窄,多数肺泡腔内含有大量浆液;脾脏淋巴组织发生出血、坏死,髓窦渗出浆液,并浸润有大量嗜中性粒白细胞;心肌纤维颗粒发生变性;肝脏大面积发生脂肪变性,且肝细胞存在空泡。
4、防治措施
药物治疗。病牛要立即隔离,注意观察和记录临床症状,如体温、饮水量、采食量、脉搏以及呼吸情况等,同时整个牛群要加强饲养管理,并饮用0.3%碳酸氢钠水溶液及淡盐水。对于已经发病的牛,可静脉注射500mL生理盐水、500mL 4%碳酸氢钠,用于补充体液,调整机体酸碱平衡,连续使用2天;也可肌肉注射30mL安乃近(或者30mL氨基比林)、5mL氨茶碱用于对症治疗。病牛还可使用抗菌消炎药物治疗,如按体重肌肉注射o.02gjkg头孢噻吩钠,或者按体重静脉注射o.06gjkg10%磺胺噻唑钠,每天3次,连续使用3天。如果病牛症状严重,可静脉注射1500-2000mL5%葡萄糖盐水,其中添加有2g维生素C注射液、30mg地噻米松磷酸钠注射液,每天1次。为避免发生酸中毒,需要时病牛可静脉注射250-500mL5%碳酸氢钠注射液。采取以上治疗措施,大部分牛经过大约5天能够治愈.症状严重时经过7-8天也能够治愈。需要注意的是,能引发该病往往不是只由一种病菌引起,通常是由于混合感染多种病原导致,因此要联合使用广谱抗菌药,通过协同作用增强治疗效果。如果牛场条件允许,可先进行药敏试验,从而选择敏感性药物,治疗效果更好。
运输管理。牛运输过程中要加强防护,可提前在车箱内铺垫厚度在4-7cm左右的稻草,且在运输过程中注意停车观察。只要发现有牛患病,或者由于急刹车、路面不平而导致机体滑倒发生关节脱位或者关节扭伤,特别是呈现卧地时,要立即用钢管或者木棒隔开卧地牛,防止其他牛踩踏,但禁止粗暴地抽打、惊吓牛。运输过程中,车速适宜控制在60 km/h以内,转弯要慢要稳,禁止急刹车。运输车的两边要使用帆布进行遮挡,依次避免直流风直吹牛的口腔及鼻孔,但也要注意保持适当通风。对于不同来源和不同年龄的牛要分开饲养,并控制密度合理,防止过于拥挤。
加强饲养管理。牛到场卸载后,要先进行大约2h的休息,然后供给温水,注意添加电解多维等。经过5h,可饲喂品质优良的干草任其自由采食,且7天内禁止放养,不允许饲喂具有轻泻性的青贮饲料、鲜草、酒渣以及容易发酵的饲料,适当限制精料喂量,增加干草喂量,使机体呈六成饱即可。进圈当天,整个牛群可按每200千克体重肌肉注射10mL安瑞隆(硫酸头孢喹肟注射液),同时配合使用牛羊专用型氟苯尼考注射液,每天1次,连续使用3-5天。
1、材料与方法
1.1、材料
2头发病死亡肉犊牛由泰安市某肉牛场提供;病理组织学切片及染色相关仪器材料由山东农业大学动科院生物切片室提供;DL2000DNAMarker、无RNase双蒸水、2×Taq酶(5U/μL)等购自大连宝生物工程有限公司;EasyPureTMViralDNA/RNAKit购自北京全式金生物科技有限公司;血琼脂平板培养基,瑞氏染色液购自青岛海博生物技术有限公司;EasyScriptTMOne-StepRT-PCRSuperMix购自北京全式金生物技术有限公司。
1.2 方法
1.2.1 临床症状及剖检观察
详细询问发病牛场的发病背景,临床表现,剖检病死牛,观察内脏器官的病理变化。
1.2.2 病理组织学检查
分别取病死牛的肝脏、肺脏、脾脏、心脏、肾脏等组织,用10%中性福尔马林液固定,常规石蜡切片,HE染色,镜检。
1.2.3 细菌分离鉴定及药敏试验
无菌操作取病死牛的脾脏,在血平板上进行划线,于37℃恒温箱培养,24小时后,挑取单个菌落,分别进行革兰氏染色和瑞氏染色,镜下观察细菌形态;用氟苯尼考、庆大霉素、左旋氧氟沙星、硫酸新霉素、粘菌素药敏片做药敏试验。
1.2.4 病毒的分子生物学检测
采集病牛鼻分泌物及病死牛气管黏液进行RNA的提取,然后RT-PCR,引物设计及反应条件按周玉龙等(2011)的方法进行牛副流感3型的PCR检测,并对其产物进行1%琼脂糖凝胶电泳。
2、结果
2.1 剖检变化及组织病理学观察
剖检病死牛可见整个肺脏呈暗红色,质硬如肝,切面较干燥呈颗粒状,入水下沉,切面小叶间质水肿、变宽(图1A,B),气管内有泡沫样黏液(图1C),气管黏膜充血肿胀,支气管和纵隔淋巴结肿大出血,心脏、肝脏、肾脏肿胀、颜色变淡(图1D),脾脏肿胀呈暗红色,质地变软。所取病料经常规石蜡切片,HE染色,显微镜下观察,可见肺支气管腔内中含有黏液、脱落的上皮细胞、大量嗜中性粒白细胞及红细胞构成的炎性渗出物,肺组织广泛性肺泡壁增厚,肺泡壁充血,淋巴细胞、巨噬细胞浸润增生,肺泡腔狭窄(图2B),许多肺泡腔内充满浆液(图2A);脾脏淋巴组织出血、坏死(图2C),髓窦浆液渗出,并见许多嗜中性粒白细胞浸润(图2D);心肌纤维颗粒变性(图2E);肝广泛性细胞空泡及脂肪变性(图2F)。
2.2 细菌分离鉴定及药敏实验
用血琼脂平板划线分离细菌,倒置放在37℃培养箱中过夜,可见在血琼脂上形成灰白色湿润而黏稠菌落,无溶血现象。在45°折光下,呈现鲜明的蓝绿色并带金光,边缘有狭窄的红黄色带。挑取单个菌落、涂片,经瑞氏染色,镜下观看,呈典型两极着色,革兰氏染色呈革兰氏阴性短杆菌。药敏试验表明最敏感的药物为庆大霉素,其次是氟苯尼考。
2.3 生化鉴定
取血琼脂板菌落,进行生化试验。通过试验发现其能分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露醇、半乳糖,只产酸不产气;该菌不发酵乳糖、鼠李糖、菊糖、山梨醇。
2.4 病毒分子生物学检测
电泳结果显示,牛副流感3型病毒为阴性。
2.5 药物治疗
病牛全群用0.01%的氟苯尼考饮水,连用4天,有明显症状的病牛肌肉注射庆大霉素,按10mg/kg体重,每天注射1次,连用3~5天,病牛未再发生死亡,症状逐渐消失。
3、讨论
3.1 根据发病背景,结合临床症状、剖检病变、实验室检测结果以及临床药物治疗效果综合判定,该病例为因运输继发病毒与细菌尤其是巴氏杆菌感染引起的间质性、浆液性复合型肺炎。
3.2 通过病毒的分子生物学检测发现,该病例的病原体并非是牛副流感病毒3型,但也不能排除其他病毒如传染性牛鼻气管炎病毒、腺病毒等感染,从细菌分离结果来看,确定有巴氏杆菌感染。另外,病理组织学观察肺组织具有明显的间质性肺炎病变,所以很可能同时存在支原体感染。
3.3 运输热是在运输应激作用下引起的多种病毒、细菌感染所致的以肺炎为主要表现的呼吸系统感染。与此病有关的主要病原微生物有病毒(主要有副流感病毒、流感病毒、传染性牛鼻气管炎病毒、牛腺病毒、呼肠孤病毒、鼻病毒、肠病毒、牛病毒性腹泻病毒)、细菌(主要有巴氏杆菌、支原体、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、化脓棒状杆菌、放线杆菌等,其中巴氏杆菌是牛运输热最重要的病原之一)。一般来说,正常牛体内会携带多种上述病毒、细菌,这些病原微生物在正常情况下不会造成携带牛发病,而当机体处于应激状态时,机体免疫抵抗力下降,首先,潜伏的副流感病毒、流感病毒、传染性牛鼻气管炎病毒等呼吸道常在病毒大量复制扩散,感染致病。呼吸道条件性致病菌尤其是巴氏杆菌和支原体等病原微生物继发感染,从而导致呼吸系统多病原混合感染。该牛场所购犊牛来自不同养殖场,几经倒手,运输前已于激状态,另外,又是对运输热较敏感的犊牛,这是该病例发生的主要原因。
3.4 据细菌分离及药敏试验,选择敏感药物对发病牛群进行紧急防治是最实际的处理措施,由于该牛群发病率已经超过50%,鉴于病重牛已停止采食及药敏试验结果,采取对病重牛注射庆大霉素及全群氟苯尼考饮水的防治方案,这两种药物属于广谱抗生素,药理上两者具有协同作用,对巴氏杆菌、嗜血杆菌、支原体等呼吸道常在病原菌都具有良好疗效。
4、防治建议
4.1 为防止本病发生首先要做好肉牛长途运输的准备工作,在装载车辆内铺上5~8cm厚的垫草,防止运输过程中牛滑倒损伤,减轻牛的应激反应;在装载牛只的车辆两边用帆布遮挡,减少直流风对牛的鼻孔及口腔直吹;不要过度拥挤;加强护理,尽量减轻运输过程导致的应激反应。购牛到场后及时做好护理及药物防治工作,前三天可选择氟苯尼考、多西环素进行药物预防。自繁自养模式是肉牛场解决该病的根本措施,所以,有条件的肉牛场最好建立自己的繁殖牛群,做到自繁自养。
4.2 牛只到达新牧场时,前三天要密切关注牛群状况,逐个测量体温,如有异常立刻隔离观察,并采取适当的治疗措施。
4.3 购牛时若需要长途运输,建议在运输前使用镇静类药物,降低在运输过程中牛只对外界环境化的敏感性。运输前可以一次性肌肉注射盐酸氯丙嗪注射液,剂量按每千克体重1~1.5mg(药量大小视运输距离而定)
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